МедЕнціклопедія

Інфекційні хвороби

ПЛР - це метод лабораторної діагностики, спрямований на виявлення збудників інфекційних захворювань. Трибуквений варіант - це абревіатура назви «полімеразна ланцюгова реакція». Власне, в цій назві і відбивається суть методу, але для того, щоб розібратися, доведеться грунтовно згадати шкільний курс біології.



Але спочатку - трохи історії. Метод ПЛР був розроблений в 1983 році Кері Мюлліса, за що він був удостоєний Нобелівської премії. Спочатку метод використовувався в основному для наукових цілей, але потім, розгледівши його перспективність і ефективність, метод стали просувати в практичну медицину.

У літературі дуже часто зустрічається таке образне опис ПЛР: це метод, за допомогою якого вчені можуть знаходити голку в стозі сіна і потім будувати стіг з цих голок. В принципі, дуже точний опис. Якщо продовжувати порівняння, то голка - це невелика ділянка генетичного матеріалу мікроорганізму, а стіг сіна - це організм людини, в якому даний мікроорганізм оселився.

 

Принцип роботи

За генетичну інформацію в живому організмі будь-якого розміру відповідає ДНК - двухспіральной дезоксирибонуклеїнова кислота, що складається з послідовності чотирьох нуклеотидів, які прийнято позначати буквами А (аденін), Г (гуанін), Т (тимідину) і Ц (цитозин). Одне з основних правил генетики - правило комплементарності, тобто нуклеотиди сусідніх спіралей ДНК з'єднуються тільки в певному порядку: А з Т, Г з Ц, і ніяк інакше.

У кожного живого створення (бактерія, вірус, риба, звір) - своя ДНК, причому для виявлення конкретного організму достатньо мати лише невелику ділянку цього сховища генетичної інформації. Деякі види мікроорганізмів, наприклад, вірус імунодефіциту людини, зберігають генетичну інформацію в іншій нуклеїнової кислоті - РНК, але і її фрагменти можна знаходити за допомогою ПЛР.

Саме на виявленні цього невеликого, але унікального для кожного окремого організму ділянки і побудований принцип ПЛР. Для кожного збудника створений свій специфічний генетичний детектор, еталонний фрагмент ДНК, який за принципом комплементарності точно виявляє «свій» фрагмент ДНК і запускає реакцію створення величезної кількості його копій.

Один цикл ПЛР триває близько трьох хвилин, кількість копій зростає в геометричній прогресії. Таким чином, за кілька годин кількість фрагментів збільшується в кілька мільярдів разів. Зрозуміло, що тепер визначити, який збудник у даній конкретній інфекції, досить легко.

Переваги

Теорія - це, безумовно, чудово, але що ми маємо на виході? Яку практичну вигоду отримує людина, коли вирушає на пошуки шкідливих мікроорганізмів, озброєний ПЛР?
Безумовно, одне з головних достоїнств - це універсальність методу. ПЛР дозволяє виявляти будь ДНК і РНК, навіть коли безсилі інші методи. Обладнання, що використовується для ПЛР, стандартно, воно не залежить від того, що саме і де саме ми шукаємо.
Наступний плюс - висока специфічність. У матеріалі, направленому на дослідження, визначається унікальна послідовність нуклеотидів, характерна тільки для конкретного збудника. Таким чином, можна говорити, що специфічність методу досягає 100%. Крім того, це дозволяє одночасно, в одному і тому ж матеріалі, проводити пошук декількох збудників без якого-небудь збитку для якості відповіді.
Метод ПЛР має найвищої чутливістю - ми вже говорили про те, що можливо знайти лише один фрагмент генетичного матеріалу збудника.
Безсумнівна перевага методу - оперативність. Постановка реакції займає кілька годин, таким чином, вся діагностика, від моменту здачі матеріалу на аналіз до отримання результату, відніме всього один день.
За допомогою ПЛР визначають збудника, а не реакцію на його впровадження з боку організму. Таким чином, з'явилася можливість точно діагностувати захворювання ще в інкубаційному періоді, коли немає ніяких клінічних або лабораторних ознак хвороби.

Недоліки

Безумовно, ПЛР не ідеальний метод, є й свої недоліки. Але вони безпосередньо пов'язані з його перевагами і з так званим «людським фактором». ПЛР - дуже високотехнологічний метод, що вимагає дотримання найсуворіших правил оснащення лабораторії. Досить сказати, що в приміщенні повинен бути встановлений фільтр біологічного очищення зі ступенем 99,9%. Це пов'язано з тим, що в повітрі постійно присутній неймовірний коктейль з фрагментів ДНК всіляких живих організмів, і в процесі підготовки до проведення реакції зразок може бути забруднений - можливо «помилкове спрацьовування».

Оцінювати результати ПЛР повинен практичний лікар, який лікує конкретного хворого. Справа в тому, що далеко не завжди позитивну відповідь ПЛР означає наявність захворювання. Наприклад, людина пролікувався від якого-небудь захворювання, але загиблий і вже не небезпечний збудник буде ще деякий час «розбиратися на запчастини» захисною системою організму. Якщо в цей момент зробити ПЛР - результат виявиться позитивним.

Інший варіант - це негативний результат ПЛР при наявності навіть явної клінічної картини. Одна з найбільш можливих причин - матеріал для дослідження було взято «не звідти». Зразок повинен брати кваліфікований лікар, суворо дотримуючись інструкції, яку йому дає лабораторія.

Коли потрібно робити?

Коли слід бігти в лабораторію, щоб проаналізувати підсумки вашого літньої відпустки? Фахівці радять робити це в наступних випадках: виділення, свербіж, відчуття печіння в області статевих органів, різко змінився запах від статевих органів, дискомфорт при сечовипусканні, незвичайний характер виділень (колір, кількість, консистенція), випадковий статевий контакт без застосування презерватива.

Безумовно, ПЛР - потужний і ефективний діагностичний інструмент, що дозволяє швидко і точно знайти збудників дуже багатьох інфекцій. Найчастіше його використовують для діагностики саме захворювань, що передаються статевим шляхом. Причому найчастіше клініки та лабораторії вже пропонують своєрідні готові «набори» - 5 інфекцій, 13 інфекцій.

У будь-якому разі не можна обмежуватися тільки одним методом. Найкраще комбінувати різні методи дослідження - крім визначення самого збудника методом ПЛР необхідно оцінювати і імунну відповідь організму, який визначається традиційними вже серологічними методами, наприклад, ІФА.

І пам'ятайте: позитивну відповідь будь-якого, навіть самого сучасного лабораторного дослідження - це привід не для паніки, а для візиту до лікаря.

Знайшли помилку?!

Виділіть текст з помилкою та натисніть одночасно дві клавіші - Shift + Ентер, у вікні напишіть свій варіант виправлення помилки ...

Популярні статті

СУЧАСНА СТОМАТОЛОГІЧНА КЛІНІКА

Погана екологія, неправильний догляд, спадковість, нездоровий спосіб життя, неякісні продукти впливають на стан зубів та ясен, роблять нас постійними клієнтами…

Психологічні та сексуальні проблеми при діабеті

Про те, що діабет - це захворювання, яке характеризується високим вмістом цукру в крові, знають майже всі. Як і про те, що лікуванням діабету займаються…

Остеоартроз: причини і лікування

З віком у багатьох з нас починаються проблеми з суглобами. Рухливість їх утруднюється, а рухи супроводжуються болями. Все це ознаки остеоартрозу, хронічного…

Жити з діабетом - можна!

Відомо, що цукровий діабет 2 типу небезпечний своїми ускладненнями. Саме по собі захворювання не викликає великого дискомфорту, проявляючись лише в порушенні…

Як оперують грижі

Лікування гриж завжди хірургічне. Ніяких способів лікування гриж без використання оперативних методик не існує, застосування різного виду бандажів здатне…